自動化兼容  – 安全處理 – 無表面附著 

以前的 GravityPLUS ™懸滴系統。

世界且的 96 孔形式的懸滴板，具有自動化兼容的頂部裝載。

• 通過的 SureDrop™ 入口從頂部加載細胞懸液，該入口設計用于高度均勻和穩定的懸滴

• 在長期培養中重力輔助形成均勻的球體/有機體形態和功能，每孔產生一個球體

• 適用于許多細胞類型，包括通常不會在超低附著表面上形成球狀體或類器官的細胞

包含 10 個 Akura™ PLUS 懸滴板和 10 個 Akura™ 96 球體板，獨立包裝，由聚苯乙烯和環烯烴聚合物制成，無菌，包括蓋子。  

問：您能否推薦用于生成球體的細胞懸液的細胞濃度？ 

答：對于長期生長分析，我們建議從低細胞數開始（每滴 40 µl 250 – 500 個細胞）。如果需要使用非增殖細胞或快速生產更大的球體，請從更高的數量開始（每 40 µl 2500+ 個細胞）。通常，我們建議在使用新細胞類型時嘗試不同的濃度來確定您的范圍。 

問：什么是 SureDrop™ 進樣口？ 

答：InSphero 的 Akura™ PLUS 懸滴板采用正在申請的 SureDrop™ 微技術，可以精確分配到懸滴中和從懸滴中吸取。由于液滴體積與接種細胞數量相對應，Akura™ PLUS 懸滴板生產的球體顯示出出色的尺寸一致性，整個 96 孔板的直徑變化不超過 5%。為確保 SureDrop™ 密封，重要的是移液器吸頭與孔表面充分接觸，以確保的液體轉移和均勻的液滴形成。彈簧加載的孔彈性調整，以確保在移液過程中施加向下壓力時保持接觸。  

問：Akura™ PLUS 懸滴板每滴的體積是多少？ 

答：為了獲得且穩定的懸滴，輕輕地將 40 µl（移液速度 < 50 µl/sec）的細胞懸液注入 Akura™ PLUS 懸滴板的每個孔中。重要提示：要生成大小和細胞組成均一的球體，必須在接種到 Akura™ PLUS 懸滴板之前輕輕上下吹打，以確保細胞分布均勻。 

問：為什么您建議在轉移球體之前預潤濕 Akura™ 96 板孔？ 

答：在轉移之前需要預先潤濕 Akura™ 96 板的孔，以防止包含氣泡。為此，通過將放入孔中，將 40 μl 的聚集介質應用于每個孔。通過將放在井的上腔的壁架上來去除預潤濕溶液。吸出培養基，直到從每個孔中取出。微量 (< 5-7 µl) 可能殘留在腔室底部。 

問：如何將球體轉移到接收器 (Akura™ 96) 板中？ 

答：通過將三個銷釘定位到 Akura™ 96 板頂部表面上的相應孔中，將帶有 Akura™ PLUS 板條的框架放在 Akura™ 96 板上。然后，Akura™ PLUS 板下方的液滴將與下方 Akura™ 96 板的孔對齊。使用緩慢的移液速度 (≤ 10 µl /sec)，通過 Akura™ PLUS 懸滴板孔的入口加入 70 µl 培養基或緩沖液。確保移液器吸頭與孔入口緊密接觸。 

問：防止板外孔蒸發的方法是什么？ 

答：外排（周邊）孔的蒸發是大多數低容量培養平臺常見的現象，因此需要特別注意保持適當的濕度控制。盡管遵循以下建議時，懸滴（Akura™ PLUS 板）的外排或 Akura™ 96 板的孔中蒸發是可能的。如果不加以控制，顯著的蒸發會導致培養基成分（例如血清、鹽）的濃縮或沉淀，從而影響球狀體的形成或健康，并可能在長期的過程中改變培養基中化合物/添加劑的有效濃度。學期實驗。為在使用 Akura™ PLUS 懸滴系統時提供的濕度控制，我們建議如下： 

• 使用濕度控制良好（>95% 相對濕度）的培養箱，并在保持和盡量減少濕度損失方面進行實踐（例如盡量減少培養箱門的打開和關閉）。

• 在 Akura™ PLUS 懸滴板中形成微組織期間，始終使用底板中提供的加濕器墊，并用無菌 0.5x 稀釋的 PBS 浸泡。這是在懸滴中微組織成熟期間保持 Akura™ PLUS 板中適當濕度的關鍵。

• 對于濕度控制不佳的培養箱，可將低滲緩沖溶液（例如 0.2× PBS）應用于加濕墊。

• 對于 Akura™ 96 板中的培養，建議在每個孔中至少加入 50-70 µl 培養基，如果培養箱濕度控制是一個持續存在的問題，可以增加到最多 80 µl。如果條件需要，也可以將介質交換頻率增加到每隔一天或每天一次。 

• 我們建議使用 InSphero Incubox (InSphero CS-10-001-00) 來減少使用低頻介質交換進行長期研究時的邊緣效應。Incubox 將于 2021 年第四季度推出，可在 上購買。