包裝規(guī)格:
特點(diǎn):
1.單電纜電源,寬電壓適應(yīng)
2.包含紫外透射燈的電泳池
3.緩沖液排出角
4.可分拆的電泳池蓋子,用于形成暗室
5.紫外防護(hù)罩,可以拆下
6.帶濾光片的暗室罩子,用于凝膠拍照,可以拆下
7.特殊設(shè)計(jì)的梳子,用于制作點(diǎn)樣孔和收集孔
8.一次同時(shí)檢測(cè)80個(gè)樣品的DNA擴(kuò)增
9.一次同是純化20個(gè)樣品的DNA擴(kuò)增
產(chǎn)品參數(shù):
1.主體 240毫米(長(zhǎng)) X 270毫米(寬) X 84毫米(高)
2.電泳池 135毫米(長(zhǎng)) X 185毫米(寬) X 50毫米(高)
紫外部分 60毫米(長(zhǎng)) X 170毫米(寬)
3.紫外燈: 210.5毫米(長(zhǎng))X 15.5毫米(直徑)
功率 6W
波長(zhǎng)范圍 280nm—360nm
峰值波長(zhǎng) 302nm
平均使用壽命3000小時(shí)
4.電泳池蓋子,用于形成暗室
148毫米(長(zhǎng)) X 220毫米(寬) X 60毫米(高)
5.紫外防護(hù)罩 148毫米(長(zhǎng)) X 212毫米(寬) X 53毫米(高)
6.用于凝膠拍照的暗室罩子
147毫米(長(zhǎng)) X 198毫米(寬) X 210毫米(高)
紫外/紅外截止濾光片 35毫米(直徑)
7.小型凝膠(7孔)58毫米 X 59毫米
大型凝膠(13孔)101毫米 X 59毫米
8.安全微開(kāi)關(guān)
125VAC時(shí)5A,250VAC時(shí)3A
9.電氣規(guī)格
輸入電壓:220V交流,60Hz或110V交流,50/60Hz
輸出:直流100—110V,用于電泳。
交流100—110V,用于紫外燈
功率:30VA
客戶名單:
美國(guó)哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院
美國(guó)約翰霍普金斯大學(xué)
美國(guó)加州大學(xué)
美國(guó)芝加哥大學(xué)
美國(guó)南達(dá)科他大學(xué)
日本早稻田大學(xué)
日本里肯腦科學(xué)研究所
日本IWATE醫(yī)學(xué)院
加拿大GRAIN實(shí)驗(yàn)室
加拿大阿爾伯特大學(xué)
加拿大UBC大學(xué)
加拿大渥太華自然資源研究院
加拿大MCGILL大學(xué)
韓國(guó),南非,巴西,中國(guó)臺(tái)灣,泰國(guó),新加坡,英國(guó),智利等國(guó)家有幾百用戶。
客戶評(píng)價(jià):
“NA100®節(jié)省了我大量的時(shí)間,的確是很實(shí)用的新儀器!”
----韓國(guó)首爾大學(xué) 張載豪 教授
產(chǎn)品特性:
NA 100® 的特性
DNA擴(kuò)增
↓
NA 100方法 傳統(tǒng)方法
↓ ↓
電泳,檢查擴(kuò)增子,同時(shí)純化DNA 電泳
↓
移動(dòng)凝膠到紫外透射燈上檢查條帶
↓
DNA純化步驟花費(fèi)超過(guò)30分鐘和額外的試劑費(fèi)用
在進(jìn)行一次電泳后確認(rèn)的80個(gè)PCR產(chǎn)物的條帶。
在NA100中用一個(gè)常規(guī)照相機(jī)拍攝的圖片
NA100純化PCR產(chǎn)物后的序列數(shù)據(jù)
分子尺寸標(biāo)記,1bp梯度,來(lái)源于NA100純化的DNA克隆。
相關(guān)技術(shù),實(shí)驗(yàn)方法介紹:
電泳的通用技術(shù)
。
。
A.凝膠的準(zhǔn)備
1. 在微波中熔化瓊脂糖并在60℃放置超過(guò)1小時(shí)使之冷卻。這可以防止
凝膠托盤(pán)的熱損傷,而且可以移除熔化時(shí)產(chǎn)生的微空氣泡。
* 凝膠托盤(pán)具有高度的紫外透過(guò)性。然而,容易被熱損傷(80℃),乙醇,二甲苯等有機(jī)
溶劑也會(huì)損傷它。
.
2. 組裝凝膠托盤(pán)和凝膠澆鑄器。
* 如果在這一步組裝了梳子,有很高的可能性在凝膠里穿透孔的底部。
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3. 把熔化的瓊脂糖倒入凝膠托盤(pán)
4. 在熔化的瓊脂糖凝固之前把梳子放到凝膠澆鑄器上
*為了制作收集孔,在組裝梳子之后,輕微的向左或右一起推點(diǎn)樣孔和收集孔,以制作垂直
平行的孔
.
5. 在瓊脂糖凝固之后,沿垂直向上的方向取下梳子。
.
6. 移除凝膠托盤(pán)底部的凝膠刮屑。
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7. 保持托盤(pán)里的凝膠處在與EB混合的電泳緩沖液中。
*當(dāng)凝膠從托盤(pán)里分離出時(shí),凝膠容易破損,尤其是帶收集孔的。不要分離他們
.
8. 在使用瓊脂糖凝膠之前,把凝膠移動(dòng)到另一個(gè)非EB電泳緩沖液的容器中。
然后,使用移除在點(diǎn)樣孔和收集孔中的凝膠刮屑。
B.電泳
.
1. 檢查極性轉(zhuǎn)換開(kāi)關(guān),開(kāi)關(guān)必須按到左邊。
2. 把帶凝膠的托盤(pán)放到電泳池的暗藍(lán)色部位。
3. 用電泳緩沖液填滿電泳池。
4. 在點(diǎn)樣孔里點(diǎn)樣。
5. 把帶紫外防護(hù)罩的電泳池蓋子蓋上。
6. 檢查電泳池蓋子壓下的限位開(kāi)關(guān)。
7. 打開(kāi)電泳開(kāi)關(guān)(EP)。
8. 兩分鐘之后,打開(kāi)紫外燈并檢查DNA條帶。檢查之后,關(guān)閉紫外燈。
9. 因?yàn)镈NA的遷移速度受DNA尺寸和瓊脂糖濃度影響,在五分鐘或十分
鐘后再次檢查DNA條帶。
*當(dāng)紫外燈持續(xù)打開(kāi)超過(guò)兩分鐘時(shí),打開(kāi)風(fēng)扇開(kāi)關(guān)以防止紫外燈的熱量積累
.
10. 為了拍攝DNA條帶,把電泳池蓋子用暗室罩子替換并檢查限位開(kāi)關(guān)。
*如果暗室的濾光片因蒸汽起霧,用鏡頭紙擦拭。
C.用NA 100進(jìn)行DNA純化
.
載入DNA 洗提DNA 瓊脂糖凝膠
1. 瓊脂糖凝膠的準(zhǔn)備
* 如果凝膠被浸泡在TAE,TBE,或TE緩沖液與EB混合,吸空收集孔??梢允褂靡埔浩魑?br> 收集孔,需要非常小心。更好的辦法是使用濾紙或衛(wèi)生紙折疊成細(xì)長(zhǎng)條,吸干收集孔。
.
2. 按照B里面1到2步驟進(jìn)行。
3. 用電泳緩沖液填充電泳池,根據(jù)需要選擇0.1X到1X的TE,TAE或TBE。
緩沖液不應(yīng)該沒(méi)過(guò)瓊脂糖凝膠表面。不要過(guò)量填充。見(jiàn)上圖。
4. 然后,用超過(guò)15uL的1X或0.1X TE緩沖液填充進(jìn)收集孔(見(jiàn)D.電泳緩
沖液),在PCR純化包里這也被用作通常的DNA溶解和洗提緩沖液。
5. 按照電泳部分4到9步驟進(jìn)行。
6. 如果DNA收集到收集孔里,關(guān)閉EP和紫外開(kāi)關(guān),取下電泳池蓋子并用移液器收集DNA。
7. 如果DNA條帶已經(jīng)超過(guò)收集孔,把極性轉(zhuǎn)換器開(kāi)關(guān)按到右邊反轉(zhuǎn)電泳方向。
圖1-3:DNA遷移方式圖4:DNA收集到收集孔里
圖5和6:DNA超過(guò)了收集孔
D.電泳緩沖液
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* 總體而言,1X TAE或TBE緩沖液被用于電泳。即使使用0.1X到0.5X TAE
或TBE代替1X緩沖液進(jìn)行電泳,結(jié)果也沒(méi)有問(wèn)題。這種低濃度的緩沖液延
長(zhǎng)了設(shè)備的使用壽命,因?yàn)榻档土穗娪具^(guò)程中的熱量和蒸汽。
* 即使使用TE緩沖液(1X TE:10mM Tris. 1mM EDTA; 0.1X TE: 1mM
Tris. 0.1mM EDTA)代替TAE或TBE進(jìn)行電泳,電泳結(jié)果也沒(méi)有問(wèn)題。
* 如果電泳緩沖液重復(fù)使用多次或不使用放置多日,應(yīng)該進(jìn)行濃縮。
注意:高度濃縮或污染的緩沖液降低儀器的使用壽命,因?yàn)樵黾恿穗娪?br> 過(guò)程中的熱量和蒸汽
E.加樣緩沖液
.
* 在DNA電泳中一般使用的6X加樣緩沖液為0.25%溴藍(lán),0.25%二
甲苯藍(lán),以及40%(w/v)蔗糖水溶液。因?yàn)榧訕泳彌_液染料與DNA同
方向遷移,DNA條帶變模糊。
* 紫外透射燈,NA100®的特點(diǎn)之一,使實(shí)時(shí)檢查DNA遷移方式成為可能。
通過(guò)使用與DNA反向遷移的加樣緩沖液,可以看到清晰的DNA條帶。推
薦使用另一種加樣緩沖液,0.05%和40%(w/v)蔗糖水溶液。
因?yàn)橛?/span>NA100®可以實(shí)時(shí)的檢查DNA遷移方式,這種6X加樣緩沖液只被
用來(lái)檢查是否已經(jīng)正確加樣。
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注意:與DNA反向遷移
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F.NA100的使用后維護(hù)
1. 不要重復(fù)使用電泳緩沖液超過(guò)10次,不要在電泳池里放置不用超過(guò)2-3天。
濃縮的或污染的緩沖液增加了熱量和蒸汽。為了防止緩沖液的濃縮或污染,
把緩沖液移到帶蓋子的瓶中。
2. 使用NA100®之后,把透明的紫外防護(hù)罩放在電泳池上以防止電泳池或緩
沖液的蒸發(fā)或污染。
3. 把電泳池蓋子放在透明紫外防護(hù)罩上面。
4. 把暗室罩子放在電泳池蓋子上面
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