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上海研生生化試劑有限公司

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波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50T

品牌

廠商性質代理商

所在地上海市

更新時間:2020-11-03 14:57:13瀏覽次數:800次

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波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
    1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

 波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Bordetlla spp.PCR

 貨號

 HE30713-R

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
Mallow (Malva neglecta) Aerial Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品 包裝;1g

Mallow (Malva neglecta) Aerial Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml 包裝;5g

Mallow (Malva neglecta) Aerial Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:100μg/mL,基體:1%HNO3 包裝;100mg

Mallow (Malva neglecta) Aerial Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:500mg/L,溶劑: 包裝;50mg

Mallow (Malva neglecta) Aerial Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000µg/mL,基體:1%HCl 包裝;10g

Oregon Grape (Mahonia aquifolium) Aerial Parts Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml 包裝;250g

Oregon Grape (Mahonia aquifolium) Aerial Parts Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml,介質:2.0mol/L HCl 包裝;50g

Oregon Grape (Mahonia aquifolium) Aerial Parts Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/L HCl 包裝;100g

Oregon Grape (Mahonia aquifolium) Aerial Parts Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml;溶劑:1.5mol/L硝酸 包裝;500g

Oregon Grape (Mahonia aquifolium) Aerial Parts Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml,介質:0.05mol/L NaOH 包裝;100g

Oregon Grape (Mahonia aquifolium) Aerial Parts Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml 包裝;1ml

Lavender (Lavandula angustifolia) Flower Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:100µg/mL,基體:1%HNO3 包裝;25g

Lavender (Lavandula angustifolia) Flower Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000µg/mL,基體:10%HCL 包裝;5g

Lavender (Lavandula angustifolia) Flower Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml 包裝;1g

Lavender (Lavandula angustifolia) Flower Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:1000μg/ml 包裝;5g

Lavender (Lavandula angustifolia) Flower Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:100μg/mL,基體: 10%HCl 包裝;25g

Lavender (Lavandula angustifolia) Flower Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE) 質量規格:100μg/ml,基體:HCI 包裝;5g
波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書ChaetormiumbrasillenseBatistaetPontual 中文名稱:巴西毛殼種屬:ChaetormiumbrasillenseBatistaetPontual安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14,17生長條件:25-28℃ 純度:97%

CephalosporiumacremoniumCorda 中文名稱:頂頭孢霉種屬:CephalosporiumacremoniumCorda安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14,17生長條件:25-28℃ 純度:1.0 M in THF

Botrytis│cinerea Pers. 中文名稱:灰葡萄孢種屬:Botrytis│cinerea Pers.分離基物:葡萄提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:進行分析檢測及抗病性鑒定,指導。培養方法培養基:66生長條件:20存儲條件:定期移植法 純度:1.0 M in THF

Aspergillus wentii Wehmer 中文名稱:溫特曲霉種屬:Aspergillus wentii Wehmer安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧 純度:97%

AspergillusterricolaMarchal 中文名稱:棲土曲霉種屬:AspergillusterricolaMarchal安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:15,17生長條件:25-28℃ 純度:≥99.0%(GC)

Aspergillus│sojae 中文名稱:醬油曲霉種屬:Aspergillus│sojae提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:≥99.0%(GC)

Aspergillus parasiticus Speare 中文名稱:寄生曲霉種屬:Aspergillus parasiticus Speare提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應用領域:產培養方法培養基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧 純度:≥99%

Streptomycesthermophila 中文名稱:嗜熱鏈霉菌種屬:Streptomycesthermophila安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:12生長條件:28℃ 純度:≥99%

 

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