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貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒說明書

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產(chǎn)品型號50T

品牌

廠商性質(zhì)代理商

所在地上海市

更新時間:2020-11-05 12:30:22瀏覽次數(shù):677次

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貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

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產(chǎn)品名稱

貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 DobravaBelgrade Virus PCR

 貨號

 HE30897-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
氨甲蝶呤/甲氨蝶呤/甲氨基葉酸/氨甲葉酸/對-[(2,4-二氨基喋啶-6)-N-甲基甲氨基]苯甲酰谷氨酸/二合氨甲嘌呤/(+)氨甲蝶呤/N-[4-[[(2,4-二氨基-6-蝶啶)甲基]甲氨基]苯甲酰]-L-谷氨酸/MTX 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g

N6-異戊烯基腺嘌呤/異戊烯酰嘌呤/6-(γ,γ-二甲基烯丙基胺)嘌呤/6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤/2-IP 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

N6-苯甲酰基腺嘌呤/N-(5H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺/N-芐基氨基嘌呤/N6-Benzoyladenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

/N-二甲氨基琥珀酰胺酸/N-二甲基琥珀酰肼/比久/調(diào)節(jié)劑995/丁二酸單(2,2-二甲基酰肼)/丁二酸-N,N-二甲基酰肼/N-二基琥珀酰胺/琥珀酸2,2-二/單(2,2-二甲基酰肼)丁二酸酰肼/DMASA/SADH/B9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

乙烯利/2-氯乙基磷酸/乙烯磷/艾斯勒爾/玉米健壯素/(2-氯乙基)膦酸/2-氯乙基膦酸/Ethephon 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

3-吲哚乙酸/吲哚-3-乙酸/氮茚基乙酸/雜茁長素/吲哚乙酸/β-吲哚乙酸/2-(3-吲哚基)乙酸/生長素/3-吲哚醋酸/IAA/IUPAC 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

3-吲哚乙酸鈉/吲哚-3-乙酸鈉/吲哚乙酸鈉/IAA-Na 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 包裝;5g

3-吲哚丙酸/吲哚丙酸/吲哚-3-丙酸/氮茚基丙酸/3-(3-吲哚基)丙醇/IPA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

3-吲哚丙酸鉀/吲哚丙酸鉀/吲哚-3-丙酸鉀/IPA-K 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;250mg

3-吲哚丁酸/吲哚丁酸/4-(吲哚-3-基)丁酸/3-吲哚基丁酸/吲哚-3-丁酸/氮茚基丁酸/IBA/IUPAC 質(zhì)量規(guī)格:>99%,SGLT-2抑制劑 包裝;25g

3-吲哚丁酸鉀/吲哚丁酸鉀/吲哚-3-丁酸鉀/IBA-K 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

α-萘乙酸/1-萘乙酸/1-萘基乙酸/α-萘醋酸/2-(1-萘基)乙酸/NAA 質(zhì)量規(guī)格:鑒別 包裝;1g

α-萘乙酸鉀/1-萘乙酸鉀/NAA-K 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g

β-萘乙酸/2-萘乙酸/β-萘醋酸/β-Naphthaleneacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:檢查 包裝;1g

多效唑/1-對-2-(1,2,4-三唑-1-基)-4,4-二甲-3-戊醇/(2RS,3RS)-1-(4-)-4,4-二甲基-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)戊-3-醇/氯丁唑/1-(4-)-4,4-二甲基-2-(1,2,4-三唑-1-基)-3-戊醇/Paclobutrazol/PP333 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g

三十烷醇/1-三十烷醇/蜂花醇/正三十烷醇/三十醇/1-羥基三十烷/蜂花烷醇/Triacontanol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5ml

馬來酰肼/青鮮素/1,2-二氫-3,6-噠嗪二酮/順二酰肼/抑芽丹/本息/失蘋果酰肼/二羥基噠嗪/Maleic Hydrazide 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;1g
貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒說明書Aerococcus│viridans 中文名稱:綠色氣球菌種屬:Aerococcus│viridans分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>98.0%(HPLC)

Rhizobium│huautlense 中文名稱:華特拉根瘤菌種屬:Rhizobium│huautlense分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:476生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>98.0%(HPLC)

Deinococcus│radiodurans 中文名稱:耐輻射異常球菌種屬:Deinococcus│radiodurans提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:教學(xué)科研,探討磷酸戊糖途徑與DNA輻射損傷修復(fù)機制的關(guān)系。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Bacillus│malacitensis 中文名稱:馬拉加芽孢桿菌種屬:Bacillus│malacitensis分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%

Brevibacterium│halotolerans 中文名稱:耐鹽短桿菌種屬:Brevibacterium│halotolerans分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20-35℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%

Arthrobacter│scleromae 中文名稱:硬結(jié)節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│scleromae分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%

Pseudomonas│congelans 中文名稱:結(jié)冰假單胞菌種屬:Pseudomonas│congelans分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>97.0%(GC)

Serratia│plymuthica 中文名稱:普利茅斯沙雷氏菌種屬:Serratia│plymuthica分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>97.0%(GC) 

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