產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱:蠶白僵菌PCR檢測試劑盒說明書
規(guī)格:50T
編號:HE31749-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。?
儲需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
保存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
粘蛋白 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Type IS; from bovine submaxillary glands純度:≥95%
N,N'二琥珀酰亞基碳(>98%,EP) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,EP純度:≥95%
氟化鎳四水(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
二氧化硅(>99.9%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.9%,BR純度:≥99%
氟化鍶(>97%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,BR純度:≥98%
丁香醛(>98%,BP) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BP純度:≥98%
四唑紫(>98%,BS) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BS純度:≥97%
2基吲哚(>97%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,BR純度:≥97%
銨鋁十二水(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
AMP緩沖液(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
并咪唑(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
羧肽酶 B >170 U/mg 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BC純度:≥98%
碳鈷(II)(>98~102%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98~102%,BR純度:0.97
2'脫氧脫氧胸苷5'二三鈉鹽 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,分子生物學級純度:≥98%
半乳糖氧化酶(酶活:> 30 U/mg,BC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:酶活:> 30 U/mg,BC純度:≥98%
草亞鐵二水(>99%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
ZDHHC17/HIP14 NFκB激活蛋白205一抗 * 0.1ml Carfilzomib/PR171
FANK1 HSD13蛋白一抗 * 0.1ml CEP18770
Destrin 19/ADF 肌動蛋白解聚因子19一抗 * 0.1ml Managlinat Dialanetil/CS917
Neuronsin/NTS 神經(jīng)緊張素一抗 * 0.1ml Nolatrexed dihydrochloride
NESG1/CCDC19 鼻咽上皮細胞特異性蛋白1一抗 * 0.1ml PD 173074
FOXL2 小瞼裂綜合征蛋白BPES一抗 * 0.1ml PH797804
XPC DNA補充修復XPC細胞蛋白一抗 * 0.1ml Tifluadom/KC5103
EPHA10 酪氨蛋白激酶受體A10一抗 * 0.1ml Valacyclovir HCl
液體鹽培養(yǎng)基/需氣菌厭氣菌培養(yǎng)基/Thioglycolla Medium用于培養(yǎng)需菌、微需菌和厭菌 試劑盒 組裝/原裝
液體鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)/需氣菌厭氣菌培養(yǎng)基/Thioglycolla Medium(Without Agar)用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗的細菌培養(yǎng)(GB、SN標準) 試劑盒 組裝/原裝
液體改良馬培養(yǎng)基/Martin Broth,Modified(Liquid)菌苗、生物制品和血液制品真菌無菌檢驗 試劑盒 組裝/原裝
液體改良馬培養(yǎng)基(含瓊脂)/Martin Broth,Modified(Flour)生物制品真菌無菌檢驗 試劑盒 組裝/原裝
葉測定培養(yǎng)基/Folic Acid Assay Medium嬰兒食品和乳粉中葉測定 試劑盒 組裝/原裝
耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基 試劑盒 組裝/原裝
發(fā)酵試驗培養(yǎng)基/OF培養(yǎng)基/Hugh-Leifson培養(yǎng)基/HLGB細菌的發(fā)酵試驗 試劑盒 組裝/原裝
羊膽鹽/Bile salt from sheepBR 試劑盒 組裝/原裝
蠶白僵菌PCR檢測試劑盒說明書白細胞免疫球蛋白樣受體-B抗體Quinovic acid 3-O-glucoside別名: 分子式: C36H56O10性狀: Powder純度: 93.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 烏檀屬;烏蘇烷;烏索烷;三萜苷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
CD33L抗體δ-Amyrin aceta別名: 分子式: C32H52O2性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 抗炎;抗菌;草海桐屬;齊墩果烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
細胞角蛋白10抗體Eichlerialactone別名: 分子式: C27H42O4性狀: Powder純度: 95.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 達瑪烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
軸突生長因子CD108抗體Serranediol diaceta別名: 分子式: C34H54O4性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 千層塔;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體Cabraleahydroxylactone別名: 3-Hydroxy-25,26,27-trinordammaran-24,20-olide分子式: C27H44O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 縮序米仔蘭;達瑪烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
CD329抗體Cabraleadiol別名: 分子式: C30H52O3性狀: Powder純度: 98.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 密花樫木;達瑪烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
嗜粒細胞趨化蛋白14抗體δ-Amyrin別名: Olean-13(18)-en-3β-ol分子式: C30H50O性狀: Powder純度: 96.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 無葉豆;齊墩果烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
1號染色體開放閱讀框57抗體Aglinin A別名: 分子式: C30H50O5性狀: Powder純度: 97.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 達瑪烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。