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上海研生生化試劑有限公司

當前位置:上海研生生化試劑有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白凝膠電泳>> 500ml10×TBST(pH8.0,TBS溶液/Tween20)

貨號 YS-01D96591
10×TBST(pH8.0,TBS溶液/Tween20)儲存條件:常溫運輸,4℃保存,5×SDS-PAGE上樣液短期4℃保存,長期可放-20℃保存,有效期一年。

產品屬性:

產品名稱

規格

檢測方法

10×TBST(pH8.0,TBS溶液/Tween20)

500ml


產品特點:

1. 提取過程十分簡便,勻漿離心即可,整個過程只需要十幾分鐘。

2. 采用*的溫和裂解成分,蛋白保持天然活性。

3.適用于各種動植物組織材料,包括新鮮或冰凍的材料。

4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測定等下游實驗。

5.一次可以處理100mg左右的樣品,足夠進行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測。

使用方法:

使用前,最好請在溶液A中加入自備的1M DTT溶液50μL。

一:勻漿法

?注意:對致密的實體組織(如肌肉),最好用Polytron 式勻漿機勻漿處理。

1. 稱取動物或植物組織樣品100mg,剪刀剪成黃豆大小,轉移到10-15mL的塑料離心管中。

2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式勻漿機勻漿,直到沒有肉眼可見的組織塊。為了避免產熱,可以分多次勻漿,其間放冰上讓勻漿液冷卻。

3. 將勻漿液全部轉移到1.5mL的塑料離心管中。

4. 4℃ 12000 g離心10分鐘,組織殘渣碎片將形成沉淀。

5. 將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度,請使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測定,否則溶液A中的成分會影響濃度側定)。如果要進行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。

注意事項:

1.如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀,可以將上清轉移到一個新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘,以去除可見的小碎片。

2.植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產物,如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質,可以在最后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇,混勻后-20℃放置1小時或過夜,然后4℃,12000rpm離心10min,棄上清后室溫風干,然后將樣品溶于自備的后續實驗緩沖液中即可。經過此純化處理后,部分蛋白質可能會發生變性,不能再用于活性檢測。

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