客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR試劑盒技術：
產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
樣品RNA的抽提：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
二氯(AR,99.5%,含50-150ppm異戊穩定劑)β-Amyloid Antibody對甲酰基甲酸甲酯

二氯(for GC,≥99.8%,含50-150ppm戊穩定劑)Rad23A (D7U7Z) Rabbit mAb2-氨基-5-溴-硝基三氟甲

二氯(ACS ,≥99.5%)PSMA2 Antibody1-Cbz-氨甲基哌啶

二甲基亞砜(AR,>99%(GC))PSMA3 Antibody2,5-二溴-氟吡啶

二甲基亞砜(>99.8%(GC))PSMA5 (K231) Antibody9-溴蒽

二甲基亞砜(分子生物學,≥99.9%)Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (PerCP-Cy5.5® Conjuga)呋喃酚

二甲基亞砜(多肽合成)PSMA5 (T14) Antibody5-溴-2-

二甲基亞砜(藥用級)PhosphoPlus®DARPP-32 (Thr34) Antibody Duet1H-吲唑-5-

甲(AR,99.5%)PSMA6 Antibody1,2-二甲基-5-羥基-吲哚甲酸乙酯

甲(無水級,99.8%)AMPA Receptor (GluA2/3/4) Antibody5-氯-2-噻吩叔丁基磺酰

甲(≥99.9%(GC))Phospho-Rac1/cdc42 (Ser71) Antibody2-氯-羥基-5-氟嘧啶

甲(ACS)Phospho-Rac1/cdc42 (Ser71) Antibody氟-2-羥基吡啶

甲(色譜級+, ≥99.9%)Cdc42 Antibody溴-2-氯甲

甲(蛋白測序級，≥99.9%)Puma (D7L9L) Rabbit mAb (Rodent Specific)(R)-(+)-環氧烷

甲(用于揮發性有機物的GC/MS分析， ≥99.9％)VEGF-B Antibody環磺酰

乙(95%) (AR,95.0%)PTCH2 (L849) Antibody1,2-二氨基-3,二氟

乙(95%) (for HPLC)Rac1/2/3 Antibody2-氯-吡啶

乙(95%) (GR,95.0%)Rac1/2/3 Antibody2-氟-基-吡啶
沙眼衣原體探針法熒光PCR檢測試劑盒E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45  黑色素瘤相關抗原/黑色素-A抗體100 ul

E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒MEK1/MAPKK1/MEKK1  MEK1/MAPKK1抗體(N-端)20 ul

ES1蛋白同系物，線粒體(C21orf33/HES1/KNPI)ELISA試劑盒Menin/Men1  Menin抑癌蛋白抗體100 ul

Ephrin-B2(EFNB2)ELISA試劑盒Metal ion transporr  擬南介金屬離子轉運蛋白抗體100 ul

EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒Mfn1  線粒體融合蛋白1抗體20 ul

Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)ELISA試劑盒MGMT  O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶抗體100µl

EB病毒早期抗原(EBEA)抗體(IgG)ELISA試劑盒Metallothionein  金屬硫蛋白抗體100 ul

EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgM)ELISA試劑盒LAMR1  層粘連蛋白受體1抗體（N端）100 ul

EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgG)ELISA試劑盒MTA1  腫瘤轉移相關蛋白1抗體100 ul
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。