特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。?
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Equine Arteritis Virus(EAV)RTPCR |
貨號 | HE30956-R |
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
硅膠60G/薄層層析硅膠60G/Silica gel 60G 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;5g
硅膠GF254/薄層層析硅膠GF254/Silica gel GF254 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;1g
硅膠H/薄層層析硅膠H/Silica gel H 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g
硅膠60H/薄層層析硅膠60H/Silica gel 60H 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;1g
硅膠HF254/薄層層析硅膠HF254/Silica gel HF254 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC) 包裝;250mg
硅膠板G/薄層層析硅膠板G/硅膠G薄層層析預制板/Silica gel G Pre-coated Plate for TLC 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 包裝;5g
硅膠板GF/薄層層析板硅膠板GF/硅膠GF薄層層析預制板/Silica gel GF Pre-coated Plate for TLC 質(zhì)量規(guī)格:>92.0%(HPLC) 包裝;1g
硅膠板GF254/高效薄層硅膠板GF254/硅膠GF254薄層層析預制板/High Silica gel GF Pre-coated Plate for TLC 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;25g
硅膠板H/薄層層析硅膠板H/硅膠H薄層層析預制板/Silica gel H Pre-coated Plate for TLC 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g
硅膠板HF254/高效薄層層析硅膠板HF254/High Silica gel HF254 Pre-coated Plate for TLC 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g
硅膠60熒光薄層層析鋁箔板/TLC Silica gel 60 F254 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;5g
硅膠60F254薄層層析板 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;100g
硅膠60 薄層層析玻璃板 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g
硅膠帶熒光高效薄層層析板 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;500g
兩性電解質(zhì)/Ampholyte 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g
聚酰胺/尼龍/聚酰胺樹脂/Polyamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g
聚酰胺-6-薄膜/尼龍薄膜6/聚酰胺薄膜6/Polyamide film 6 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g
馬動脈炎病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 Aviadenovirus│Avian adenovirus 12 中文名稱:禽腺病毒(12型)種屬:Aviadenovirus│Avian adenovirus 12分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:血清型參考毒株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98%
Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 中文名稱:傳染性法氏囊病病毒種屬:Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus分離基物:病雞提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98%
Aquareovirus│Grass carp hemorrhage virus 中文名稱:草魚出血病病毒種屬:Aquareovirus│Grass carp hemorrhage virus分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:制備滅活疫苗培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98%
Pasteurella│multocida 中文名稱:多殺性巴氏桿菌種屬:Pasteurella│multocida分離基物:病畜禽提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:56生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:97%
Streptococcus│apis 中文名稱:蜜蜂鏈球菌種屬:Streptococcus│apis分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:97%
Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 中文名稱:馬腺疫鏈球菌獸疫亞種種屬:Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:97%
Streptococcus│equisimilis 中文名稱:類馬鏈球菌種屬:Streptococcus│equisimilis分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:>99%, ee >98%
Streptococcus│sp. 中文名稱:鏈球菌(不定種)種屬:Streptococcus│sp.分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:>99%, ee >98%