揭示半固體瓊脂培養基促菌生長檢查方法

　　1.用于菌數計數的半固體瓊脂培養基促菌生長（靈敏度）檢查的方法：對每個不同批號的脫水培養基均應進行靈敏度檢查（促菌生長檢查）。取預先制備好的瓊脂培養基平皿3~5個，用表面涂布法每塊平板表面接種30~100個試驗菌，同時用已知質量保證的同型號培養基平皿3~5個（如較的如MERCK，DIFICOL產品）做對照試驗，待培養基表面的菌液被瓊脂培養基吸干或風干后，將培養皿倒置于培養箱的使用溫度下培養48~72小時，（也可采用澆碟法進行）取出培養后的平皿點計菌落數。樣品培養基上的微生物數量應不得低于對照培養基上微生物生長數量的70%。否則，需重新檢查，或該培養基被視為不符合促生長要求。

　　2.用于控制菌檢查的富集培養基的促菌生長（靈敏度）檢查的方法：對每個不同批號的脫水培養基均應進行靈敏度檢查。每100ml培養基內分別接入試驗菌小于100cfu，每個菌種接種兩瓶培養基，將接過種的培養基置于條件下培養。應在16~18小時后可明顯觀察到培養基內有微生物生長，則證明此培養基合格。

　　原則上無論是采用脫水培養基還是按相關處方配制的培養基，一旦制成成品培養基，則應對每個配制批號培養基進行促菌生長（靈敏度檢查）試驗，以考察培養基的質量。按脫水培養基的批號做靈敏度檢查是基于培養基的滅菌程序已經經過驗證。

　　如果實驗室使用的是商購的成品培養基，供應商應隨培養基提供相應批次的培養基質量檢測報告，報告包括培養基的PH值、無菌檢查結果和促菌生長（靈敏度）試驗結果等項目。建議在使用某一新的成品培養基（新供應商或新培養基品種）時，應至少考察三個不同批次的培養基質量，只有三批質量均合格方可使用該培養基。微生物限度檢查用成品培養基一旦初試確認合格后，可審查供應商的質檢報告，而不必每批再作無菌檢查和靈敏度檢查，但半年應至少檢查一次，以復核其質量。用于無菌檢查試驗的每批培養基，均必須按規定進行靈敏度檢查試驗，此規定同樣適用于實驗室自行配制的培養基。

　　建議在正式使用前即應完成對培養基的質量檢查。如果在進行靈敏度試驗的同時，也使用該培養基進行樣品檢查，那么，一旦培養基的無菌性或靈明度不符合規定，則檢驗結果應無效。無論這些質量控制檢查試驗何時完成，實驗室都必須在相關產品放行之前或檢驗報告發出之前，對所用培養基的無菌性及靈敏度試驗資料的完整性和合格予以確認。

　　靈敏度（促生長）檢查試驗用菌懸液，可用標準菌種制得，也可向具備適當資質的供應商購買。目前市場上的商用產品，如REMEL公司的培養基質量Quanti-cultR檢查用菌種，小瓶內每片薄膜上含有10~100CFU。此類產品使用簡單，但操作者需嚴格遵守供應商的使用要求。另外，盡管所購試菌種均附有質量證書，正式使用前，仍必須用傾注平皿法或鋪表面法等標準檢測方法對菌懸液的微生物數量進行復核確認。