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組織細胞固定

2015年08月26日 12:00:59人氣:1131來源:上海研生生化試劑有限公司

1、為什么在免疫組化中標本要進行固定?

(1)防止標本從玻片上脫落;

(2)除去防礙抗原-抗體結合的類脂,使抗原抗體結合物易于獲得良好的染色結果;

(3)固定的標本易于保存。

2、標本固定的基本原則是什么?

(1)不能損傷細胞內的抗原;

(2)不能凝集蛋白質;

(3)不能損傷細胞形態;

(4)固定后應保持細胞膜的通透性,以允許抗體進入與抗原結合。

3、常用抗原物質的固定方法的*選擇是什么?

(1)丙酮的作用是溶解膜磷脂,所有的脂質雙層(胞膜、核膜、細胞器膜等)已被破壞,但蛋白和多糖類不受影響。而丙酮固定后不需進行抗原修復,它是一種非交聯固定劑。

(2)多聚甲醛固定對酶類和脂類保護的好,易與蛋白發生交聯,所以一般經過甲醛或PFA固定后的標本一般需要抗原修復。

(3)蛋白質抗原:95%~*乙醇;

(4)酶、激素:丙酮;

(5)免疫球蛋白:*;

(6)病毒:丙酮、*、無水乙醇;

(7)多糖、細菌等:微火加熱,甲醇、10%甲醛、丙酮;

(8)類脂(異嗜性抗原):10%甲醛,10%佛茂爾(ForMol)。

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