ELISA試劑盒的選擇
醫藥人員,尤其是各大醫藥公司的動物模型,臨床實驗的研究人員在實驗設計中,需要選擇一些有疾病代表性的Biomarker,比如在特定適應癥的臨床實驗中的使用率,學術文章中的發表情況。如能有效掌握一些大數據,將給實驗設計的合理性提供了保證。
*步:測什么Biomarker?
可以根據研究文獻的數量和臨床試驗,比如TNF-a,在以下各大疾病的臨床實驗中,和對應文獻中均有使用。當然在炎癥,心血管疾病,糖尿病等疾病中的臨床試驗和使用zui多。
第二步:選什么試劑盒?
以TNF-a為例,Meso Scale Discovery® Vplex電化學發光試劑盒以0.04pg/mL的靈敏度是普通ELISA(7 pg/mL左右)的100多倍。如果實驗樣本中的TNF-a低于7pg/mL,這就意味著實驗數據會無法檢測,實驗沒有定量結論。另外一個案例,臨床常規測定普通CRP的方法檢測線性一般為3~200mg/L,而預測心血管事需要更高靈敏度的CRP,超敏或高敏CRP (hs-CRP)。
如需要檢測的是尿液,檸檬酸鹽血漿樣本,需在訂購前仔細查看Elisa試劑盒說明書中的驗證樣本。簡單的說,如果ELISA試劑盒是沒有用過試劑盒檢測尿樣,檸檬酸鹽血漿,使用該試劑盒檢測尿樣會存在極大的風險;而且很多ELISA試劑盒中還會特別說明“不能檢測檸檬酸鹽血漿”。Vplex試劑盒驗證過的樣本有血清, EDTA血漿,肝素血漿,檸檬酸鹽血漿,尿液,細胞上清液。
第三步:檢測什么樣本?試驗周期多長?
如自己采購抗體,開發ELISA方法學,如遇到抗體親和力低,由于ELISA的兩次洗脫將可能將抗體洗掉,大大影響實驗結果。Meso Scale Discovery® 可以不用洗,2.5小時完成實驗的一步法。
如實驗研究周期較長,ELISA試劑盒盡量選擇一個批次的,以防止不同批次間的差異。然而由于普通ELISA有效期在3-12個月,而實驗周期往往在1-2年以上,一些長期臨床實驗項目甚至在5-10年,因而經常面臨不同批次的挑戰。而Meso Scale Discovery®Vplex試劑盒經過54個月穩定性測試。使用Vplex,*可以用一個批次支持2-3年的實驗。
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