論著

β-環(huán)糊精包合干姜提取物的方法比較

傅秀娟，何 兵，劉 艷

（瀘州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室，四川瀘州 646000）

摘 要 目的：制備干姜提取物的 β-環(huán)糊精包合物，增加其穩(wěn)定性。 方法：分別采用研磨法、超聲法及飽和水溶液法對(duì)干姜提取物進(jìn)行包合，以 HPLC 法測(cè)定其中 6-姜辣素含量，以包合物得率和包合率加權(quán)評(píng)分為指標(biāo)，確定zuijia包合方法。 結(jié)果：以研

磨法制備的包合物得分zui高。 結(jié)論：研磨法包合干姜醇提物的效果zuijia。

   關(guān)鍵詞 β-環(huán)糊精；包合；研磨法；超聲法；飽和水溶液法

中圖分類號(hào) R943 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1000-2669（2011）2-0127-03

COMPARISON OF DIFFERENT METHODS FOR ZINGIBER OFFICINALE

ROSC．EXTRACT INCLUSION

Fu Xiujuan, et al

Department of phamceutical Andlysis,School of Pharmacy, Luzhou Medical College

Abstract Objective: To prepare β-cyclodextrin inclusion complex of Zingiber officinale Rosc．extract, in or-der to enhance its stability. Methods: Grounding method, ultrasonic method and saturated aqueous solution method were investigated. The content of 6-gingerol was determined by HPLC, and with the weighted grading of inclusion rate and yield rate as the index, the optimum method was defined. Results: Grounding method scores highest. Conclusion: Grounding method is the optimum method for Zingiber officinale Rosc．ethanol extract.

Key words β -cyclodextrin; Inclusion; Grounding method; Ultrasonic method; Saturated aqueous solution method

干姜為姜科植物姜（Zingiber officinale Rosc．）的

干燥根莖，主產(chǎn)于四川、湖南等地，其味辛、大熱。 歸

脾、胃、心、肺經(jīng)。 功能溫中散寒，回陽(yáng)通脈，燥濕消痰

^[1]，被譽(yù)為溫中回陽(yáng)之要藥。 現(xiàn)代研究表明，干姜中的

揮發(fā)性成分與非揮發(fā)性成分均為其藥理作用的相關(guān)成分，如姜酚和姜烯有強(qiáng)心升壓的作用；6-姜辣素可促進(jìn)膽汁分泌；姜油、姜酚、姜烯酮可鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解

熱等^[2]。 干姜中的有效成分穩(wěn)定性差，在貯存過程中易發(fā)生熱解、水解及氧化反應(yīng)^[3]，使有效成分發(fā)生降解，從而降低療效。 故本次研究采用 β-環(huán)糊精包合技術(shù)對(duì)提取物進(jìn)行包合，以提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

1  儀器與試劑

• 儀器

KQ3200B 型*（昆山市超聲儀器有

作者簡(jiǎn)介：傅秀娟（1982－），女，助教，碩士

限公司）；FC104 電子天平（上海精科天平）；78HW-1

型恒溫磁力攪拌器； 戴安液相色譜儀（P680A LPG 四元低壓梯度泵 ，PDA -100 二極管陣列檢測(cè)器，TCC-100 柱溫箱，Chromeleon 色譜工作站）。

• 試劑

β-環(huán)糊精（成都科龍化工試劑廠）；6-姜辣素對(duì)

照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號(hào)：200904-00218）；干姜 60%乙醇提取物（實(shí)驗(yàn)室自制）；乙腈為

色譜純，水為重蒸餾水。

• 方法與結(jié)果

2.1  包合物的制備

2.1.1  飽和水溶液法

精密稱取 β-環(huán)糊精 10g，加入 150ml 蒸餾水，于

熱水浴中加熱至 β-環(huán)糊精*溶解， 制得 β-環(huán)糊 精飽和溶液。 移取干姜醇提液 1ml，緩慢滴加至β-環(huán)

糊精飽和溶液中，用磁力攪拌機(jī)攪拌 1h。 置冰箱內(nèi)

（4℃）冷藏 24h，抽濾，沉淀以 60%乙醇洗滌 3 次，每

次 10ml。 所得沉淀于 40℃干燥，即得包合物。

2.1.2  研磨法

精密稱取 β-環(huán)糊精 10g，加入 3 倍量蒸餾水，共

同置于研缽中混合均勻后， 緩慢滴加干姜提取液

1ml，研磨 1h 后，置冰箱內(nèi)（4℃）冷藏 24h，抽濾，沉淀以 60%乙醇洗滌 3 次，每次 10ml。 所得沉淀于 40℃

干燥，即得包合物。

2.1.3  超聲法

精密稱取 β-環(huán)糊精 10g， 加入 150mL 蒸餾水，于熱水浴中加熱至 β-環(huán)糊精*溶解， 制得 β-環(huán)

糊精飽和溶液。 移取干姜醇提液 1ml， 緩慢滴加至

   β-環(huán)糊精飽和溶液中，超聲 1h。 置冰箱內(nèi)（4℃）冷藏

24h，抽濾，沉淀以 60%乙醇洗滌 3 次，每次 10ml。 所

得沉淀于 40℃干燥，即得包合物。

2.5  包合物中 6-姜辣素的含量測(cè)定

精密稱取包合物 8g，  加入 30ml75%甲醇回流

1h， 冷卻后濾過， 濾渣用 75%甲醇洗滌 3 次， 每次

5ml。 合并濾液及洗液， 并定容至 50ml。 精密吸取

20μl， 注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定， 記錄峰面積，并計(jì)算含量（見圖 2）。

• 色譜條件

色譜柱：Dikma Kromasil C18 （250mm×4.6mm，

   5μm）；流動(dòng)相 ：乙腈-水 （55∶45）；檢測(cè)波長(zhǎng) ：280nm；

流速：1.0ml/min；柱溫：30℃。

• 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的 6-姜辣

素對(duì)照品， 加甲醇制成濃度為 0.0984mg/ml 的對(duì)照品溶液。 精密量取 6-姜辣素對(duì)照品溶液 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μl 進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)定其峰面積，并

以峰面積值（A）對(duì)進(jìn)樣量（C）進(jìn)行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:y=10.417x-0.0077 r=0.9999。 結(jié)果表明進(jìn)樣量在 0.1968μg～0.9840μg 間， 進(jìn)樣量和積分面積間

線性關(guān)系良好。

2.4  干姜提取物中6-姜辣素的含量測(cè)定

移取干姜提取物 0.5ml 于 50ml 容量瓶中，加入甲醇至刻度，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得干姜提取物供試品溶液。 精密吸取 20μl，注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定， 記錄峰面積， 并計(jì)算含量為

3.874mg/ml（見圖 1）。

• 包合物得率的計(jì)算

• 2.1 項(xiàng)下制得的包合物分別精密稱定， 并按下式計(jì)算包合物得率。 飽和水溶液法、研磨法及超聲法制得的包合物得率分別為 59.48% 、83.10% 和

63.26%。

   β-環(huán)糊精重量+加入干姜提取液重量

• 包合率的計(jì)算

• 2.1 項(xiàng)下制得的包合物按照 2.5 項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，并按下式計(jì)算包合率。 飽和水溶液法、研磨法及超聲法的包合率分別為 50.60% 、85.34% 和

41.33%。

2.8  包合方法的比較

包合率為衡量包合效果的重要指標(biāo)， 包合率越高，包合效果越好，因此權(quán)重系數(shù)設(shè)為 0.7；收得率在實(shí)際生產(chǎn)中具有重要意義，在投入量一定的情況下，收得率越高，包合率越高，故權(quán)重系數(shù)設(shè)為 0.3。 將飽和水溶液法和研磨法進(jìn)行加權(quán)評(píng)分，結(jié)果（見附表）。

附表 不同包合方法考察結(jié)果表

圖1 6－姜辣素 HPLC 圖

結(jié)果表明，飽和水溶液法、研魔法和超聲法三者相比較，得分由高到低依次為研磨法>飽和水溶液法>

超聲法，因此研磨法對(duì)干姜提取物的包合效果zuijia。

3  討 論

目前對(duì)中藥包合技術(shù)的研究， 還主要集中在揮發(fā)油類物質(zhì)上面， 本文對(duì)干姜的醇提物的包合工藝進(jìn)行了研究，這方面的研究國(guó)內(nèi)外均尚少見，因此本次研究對(duì)除揮發(fā)油外的其他中藥成分的包合具有一定的參考價(jià)值。

在包合物收率的計(jì)算公式中， 由于干姜提取物中含有一定水份， 故計(jì)算所得包合物收率僅是一個(gè)相對(duì)的值，用于比較包合效果，而不是的包合物收率。 本次研究曾采用將干姜提取物換算成干姜干浸膏重量的方法進(jìn)行計(jì)算，但誤差較大。 出于本文僅旨在比較不同包合方法的包合效果， 因此暫時(shí)選擇了文中的計(jì)算方法。 對(duì)于提取物的包合物收率的計(jì)算，還有待于進(jìn)一步摸索。

在色譜條件中選擇流動(dòng)相時(shí)， 曾采用中國(guó)藥典

2010 版一部，“干姜”項(xiàng)下的方法進(jìn)行測(cè)定 ，發(fā)現(xiàn)保留時(shí)間過長(zhǎng)。 故將流動(dòng)相進(jìn)行了調(diào)整，增大了有機(jī)相的比例，使 6-姜辣素保留時(shí)間適中，分離度及對(duì)稱度均良好。

參 考 文 獻(xiàn)

1． 中華人民共和國(guó)藥典[S].2010 版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社;

2． 沈映君主編.中藥藥理學(xué)[M].2008，12.北京：人民衛(wèi)生出

版社; 3． 康廷國(guó). 中藥鑒定學(xué) [M]. 北京 ： 中國(guó)中醫(yī)藥出版社.

2003，1;

4． 謝 玲， 左亞杰.β－CD 包結(jié)揮發(fā)油工藝在中藥制劑中的應(yīng)用概況[J].湖南中醫(yī)雜志，2006；2（1）：156

（2010-08-30  收稿）