小鼠白介素6 ELISA試劑盒實驗操作步驟

2020年05月13日 15:16:33人氣：814來源：上海研生生化試劑有限公司

　　小鼠白介素6 ELISA試劑盒操作步驟：

　　1. 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。

　　2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　3. 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。

　　4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

　　5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

　　6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

　　8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。

　　9. 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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