斑點氣單胞菌PCR檢測試劑盒使用步驟

2020年05月21日 13:28:49人氣：805來源：上海研生生化試劑有限公司

　　斑點氣單胞菌PCR檢測試劑盒使用步驟：

　　一、樣品 DNA 的制備

　　1. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。

　　2. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的DNA 釋放劑試用裝。則按下面步驟操作：

　　3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個樣品)為例：在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一，20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水，充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置，但*在一周內用完，不要長期放置。一次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液，1mL 工作液足夠 10 個樣品。如果待測樣品數量為其他數字，配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應的調整。

　　4. 在標記好的 N+2 個離心管中，加入 1-5mg 固體樣品(半粒芝麻大小)或 5uL 液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照，在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。

　　5. 在每個管中加入 100 uL 溶液 A 工作液，確保固體樣品被溶液淹埋，如果是液體樣品則震蕩混勻。

　　6. 95℃保溫 10 分鐘。

　　7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個樣品得到的 DNA釋放液足夠進行 50-100 次 PCR。

　　二、弓形桿菌屬通用PCR試劑盒設置 PCR 反應(40 uL 體系)

　　8. 在 N+2 個 PCR 管中加入下列成分，下面以樣品數為 1 舉例(注意：如果*次使用DNA 釋放劑，*每個樣品設置兩個模板用量的 PCR 反應，兩個反應的模板使用量差 10 倍，由此確定*用量，以后就用效果*的那個模板用量)：

9. 輕柔混勻后上機，按下面參數進行 PCR。

　　10. 電泳檢測 PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 216bp。陽性對照必須有此條帶出

　　現，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品，需要用通用引物(如真核生物專一 PCR 引物，需自備)測試是否有抑制劑或樣品是否濃度達到 PCR 的要求，如果通用引物也擴不出來，需要濃縮并再次純化 DNA 樣品，或者更換 DNA 提取方法，直到通用引物能夠擴增出預計大小的片段。

上一篇：壓濾機泵與普通水泵的區別

下一篇：工業計算機故障常見的七種檢測方法--晶創越世

全年征稿/資訊合作 聯系郵箱：1271141964@qq.com

免責聲明

凡本網注明"來源：智能制造網"的所有作品，版權均屬于智能制造網，轉載請必須注明智能制造網，http://www.xashilian.com。違反者本網將追究相關法律責任。
企業發布的公司新聞、技術文章、資料下載等內容，如涉及侵權、違規遭投訴的，一律由發布企業自行承擔責任，本網有權刪除內容并追溯責任。
本網轉載并注明自其它來源的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點或證實其內容的真實性，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品來源，并自負版權等法律責任。
如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。

大地资源网视频在线观看新浪,日本春药精油按摩系列,成人av骚妻潮喷,国产xxxx搡xxxxx搡麻豆

斑點氣單胞菌PCR檢測試劑盒使用步驟

免責聲明