人CD44變體6ELISA檢測試劑盒洗滌方法：

1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效

人結直腸腺癌細胞；HT-29

人巨細胞白血病細胞株；Mo7e

人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H157

人前列腺癌細胞；PC-3 [PC3]

人紅系白血病細胞；TF-1

人乳腺導管瘤細胞；UACC812

人類原巨核細胞型白血病細胞；UT-7

人惡性黑色素瘤細胞；A-375 [A375]

人乳腺導管瘤細胞；BT-474

人結直腸腺癌細胞；COLO 205

人結直腸腺癌細胞；COLO 320DM [COLO320DM]

人Burkkit淋巴瘤細胞；Daudi

人十二脂腸腺癌；HuTu-80

人鼻咽癌細胞；CNE-2Z

人胎盤絨膜癌細胞；BeWo

人結直腸腺癌細胞；HCT 116 [HCT116]

人T淋巴瘤轉基因細胞；Jurkat D,E

人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系；Jurkat77

人口腔表皮樣癌細胞；KB

人結直腸腺癌細胞；LoVo

人結直腸腺癌細胞；SW480 [SW 480；SW-480]

急性T淋巴細胞白血病細胞；TALL-104

人腎癌細胞；A498

人宮頸癌細胞；C-33A

人宮頸癌細胞；Hela 229 [HeLa229]

人宮頸癌細胞；Hela P10s-11F

人宮頸癌細胞；Hela S3 [HeLaS3]

人胰腺腺泡上皮癌；HPAC

人T淋巴細胞白血病細胞；HuT 78

人肺鱗癌細胞；NCI-H520

人前列腺癌高轉移細胞株；PC-3M IE8

人前列腺癌低轉移細胞株；PC-3M-2B4

人肺巨細胞癌高轉移細胞株；PG-BE1

人肺巨細胞癌低轉移細胞株；PG-LH7

人結直腸腺癌細胞；SW620 [SW 620；SW-620]

人腦星形膠質母細胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG]

人肺癌細胞；A-427 [A427]

人胰腺癌細胞；AsPC-1

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞；C918

人髓母細胞瘤細胞；Daoy

人乳腺導管癌細胞；HCC38

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞；M619

人胃癌細胞；MGC-803

綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞；MGC803-GFP

人胃癌細胞；MKN-45

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞；MuM-2B