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液相色譜儀的使用常識

2022年05月05日 11:51:59人氣：474來源：上海奧析科學儀器有限公司

　　液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。今天小編來具體介紹一些液相色譜儀的使用常識，希望可以幫助用戶更好的應用產(chǎn)品。

　　貯液瓶的日常維護

　　清潔是保持流動相貯液瓶正常使用的關(guān)鍵，使用LCMS級的溶劑和試劑。陳舊的流動相和用久了的試劑應定期廢棄，防止生長微生物和組分改變。貯液瓶內(nèi)壁定期清洗，流動相濾頭定期清洗或更換。

　　液相泵的日常維護

　　泵的密封圈是zui易磨損的部件，密封圈的損壞可能引發(fā)漏液或劇烈壓力波動;單向閥的正常工作至關(guān)重要，它若發(fā)生故障，將直接影響流速的穩(wěn)定性。

　　日常維護應注意以下幾點：

　　①使用LCMS級的溶劑和試劑;

　　②確保系統(tǒng)壓力在正常范圍;

　　③使用完緩沖液體系后用純水沖洗干凈，防止鹽沉積，系統(tǒng)不運行時應存儲在無緩沖液的溶液或有機溶劑中;

　　④密封圈按照各個生產(chǎn)廠商的建議定期更換。

　　進樣器的日常維護

　　樣品預處理對于防止進樣針和進樣閥堵塞至關(guān)重要。

　　預處理常用方法：

　　①超濾;

　　②溶劑萃取/去鹽;

　　③固相萃取;

　　④灌注凈化/去鹽;

　　⑤色譜分離;

　　⑥甲醇或乙腈沉淀蛋白;

　　⑦酸水解，酶解;

　　⑧衍生化。

　　色譜柱的維護和保存

　　①每次工作結(jié)束，用高比例強溶劑沖洗色譜柱，沖去留在柱上的強吸附組分;

　　②凈化樣品，樣品中的微粒會進入色譜柱，在柱頭上沉積下來，造成柱壓升高，柱效降低;

　　③避免撞擊色譜柱，如掉落或超聲震蕩;

　　④柱壓避免急劇變化;

　　⑤反相柱C18應保存在純有機相或50%有機相中，一周不用要卸下，兩端用堵頭密封，避免干枯。

　　流動相的選擇

　　LCMS常用的流動相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發(fā)鹽的緩沖液，如甲酸銨、乙酸銨等，還可以加入易揮發(fā)酸堿如甲酸、乙酸或氨水等調(diào)節(jié)pH值;LCMS體系要避免使用含磷或氯的緩沖液，含鈉和鉀的成分必須<1mmol/l。(鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%，含三氟乙酸<0.5%，含三乙胺<1%，含醋酸銨<10—5 mmol/l。

　　樣品的預處理

　　從保護儀器角度出發(fā)，防止固體小顆粒堵塞進樣管道和噴霧針，防止污染MS,降低分析背景，排除對分析結(jié)果的干擾;從ESI電離得過程分析看，電荷聚集在液滴的表面，樣品和雜質(zhì)在液滴表面相互競爭，不揮發(fā)物(如磷酸鹽等)妨礙帶電液滴揮發(fā)，大量雜質(zhì)妨礙帶電樣品離子氣化，增加電荷中和的可能。

關(guān)鍵詞：液相色譜

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