小鼠角膜成纖維細胞提取物凍存指導原則

凍存細胞系以備將來之用時，必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣，我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明，以便獲得*佳結果。 

1）在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存，并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意*佳凍存條件取決于所用細胞系。 

2）細胞應緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。

3）必須使用的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑

4）將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存；溫度高于 -50°C 時，冷凍的細胞將開始變質。 

5）必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存 

6）必須穿戴個人防護設備。 

7）所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術，并且在層流通風櫥內進行。

凍存對培養的細胞進行凍存的*佳方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險  (冰晶可損傷細胞，導致細胞死亡)。

注：DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時，應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范，并應按照當地法規處置此類試劑。