HPLC使用過程中常見問題及解決方法
1. 排氣閥里的過濾經(jīng)常芯堵塞
如果是排氣閥里的過濾芯堵塞引起的壓力升高，請仔細(xì)檢查一下?lián)Q下來的過濾芯。正常情況下，一個過濾芯可以使用6個月左右，如果經(jīng)常更換就有問題。
- 如果過濾芯的顏色發(fā)黑，說明是被柱塞密封墊磨損下來的碎屑堵塞的，請確認(rèn)流動相使用的緩沖鹽的濃度是否太高了，是否使用了柱塞清洗裝置。 緩沖液在泵頭內(nèi)部析出的鹽的結(jié)晶會加速密封墊的磨損。
- 如果過濾芯的顏色是乳白色的，非常干凈。說明過濾芯很有可能是被流動相污染了。 請檢查一下您是否使用了過期的溶劑（水，有機(jī)溶劑），或質(zhì)量不好的溶劑。請馬上更換別的品牌的溶劑或使用純凈水（推薦：娃哈哈純凈水）。
如果流動相經(jīng)過了濾膜過濾，請確認(rèn)是否使用了正確的，的濾膜。建議您先不要使用濾膜過濾流動相，看看是否可以解決過濾芯堵塞的問題。
- 如果存放緩沖液或水的溶劑瓶不經(jīng)常清洗，該通路會生長藻類，藻類會污染整個流路系統(tǒng)和脫氣機(jī)的腔體，藻類及其代謝產(chǎn)物也會堵塞過濾芯。如果發(fā)生了這種情況，建議用60度的熱水清洗溶劑瓶，并用異丙醇清洗整個管路和脫氣機(jī)。建議以后一定要用棕色瓶存放緩沖溶液，避光，并且定期清洗溶劑瓶。
HPLC使用過程中常見問題及解決方法
2.峰面積或峰高重現(xiàn)性不好，偏差大
如果HPLC系統(tǒng)配有自動進(jìn)樣器，這種情況主要是自動進(jìn)樣器的問題。
- 首先確認(rèn)柱前壓是穩(wěn)定的，保留時間的重現(xiàn)性好（參見第1，2條）
- 將自動進(jìn)樣器的抽樣速度降低到50ul/min以下 （默認(rèn)值是200ul/min）.您的樣品有可能粘度較大，降低抽樣速度可以極大地改善粘度較大的樣品的進(jìn)樣精度。
- 如果進(jìn)樣針或針座有輕微的堵塞，對進(jìn)樣精度的影響也非常大。請參考第5條的處理辦法。
- 如果是手動進(jìn)樣器，請確認(rèn)一定要使用Agilent配的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣針，且進(jìn)樣器的廢液出口要與進(jìn)樣口水平，避免虹吸的影響。如果是滿Loop進(jìn)樣，建議注
射5倍Loop的進(jìn)樣體積。
HPLC使用過程中常見問題及解決方法