1、轉染前細胞的處理（以24孔板培養為例）：
貼壁細胞：在轉染前一天，在24孔板內鋪上0.5×105細胞，500ul無抗生素培養基培養一天，到轉染時使細胞達到80％～90％的匯合率。
懸浮細胞:在制備混合物前，將4—8×105細胞用無抗生素培養基培養鋪鋪于24孔板內。
2、轉染方法（以質粒DNA轉染為例）
2.1、將DNA質粒溶于50ul無血清的Opti－MEM Ⅰ Reduced Serum Medium中。混合均勻。
2.2、將適量Lipofectamine 2000溶于50ul無血清的Opti－MEM Ⅰ中，混合均勻。在室溫下孵育5分鐘（在25分鐘內進行步驟c）。
2.3、孵育5分鐘后，將上述兩種混合物混合（總體積100ul）。輕輕混合均勻在室溫下孵育25分鐘（可能出現霧狀沉淀）。復合無在室溫下六小時內穩定。
2.4、在24孔板中每孔加入100ul的復合物以及適量培養基。十字法混合均勻。
2.5、細胞在37。C CO2培養箱中培養18－48個小時后，測量轉染效率。在加完復合物4－6小時候可更換培養基。
3、轉染注意事項
3.1、轉染嚴格來說，每種細胞的條件是不一樣的，如果實驗時，不能確定*轉染條件，請在細胞實驗組共享文件夾查找類似細胞的轉染方法；
3.2、轉染結果的好壞，與DNA質量密切相關，務必在實驗之前對去內毒素質粒DNA的質量進行嚴格鑒定，至少采用以下兩種方法：瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度檢測，如果有條件，可對質粒DNA去內毒素質量的進行檢測。